重组α-半乳糖苷酶消除大豆低聚糖引起的小鼠肠胃胀气的研究
参考：王璇琳等，营养学报，2006，28（5）：434－437
【摘 要】目的：分析食用大豆及其制品中的低聚糖引起肠胃胀气的原因。基因重组 α-半乳糖苷酶对棉籽糖和水苏糖进行酶解，低聚糖对小鼠肠胃胀气的缓解情况。方法：以棉籽糖和水苏糖标准品作为受试物，分别灌胃给予不同周龄的昆明种小鼠，分析棉籽糖和水苏糖是否引起小鼠肠胃胀气；通过测量小鼠胀肠容积的方法检测胀气情况；硅胶薄层层析（TLC）检测低聚糖；SDS-PAGE 法检测大豆蛋白。结果：棉籽糖、水苏糖均能够引起小鼠肠胃胀气；基因重组 α-半乳糖苷酶可以消除小鼠食用棉籽糖和水苏糖后的肠胃胀气现象。结论：α-半乳糖苷酶可做为食品添加剂，用来解决食用豆制品时发生的肠胃胀气。
【前 言】大豆低聚糖的主要成分为水苏糖、棉籽糖(或称蜜三糖)和蔗糖等寡糖,由于人体内缺乏水解棉籽糖和水苏糖的α-半乳糖苷酶，棉籽糖和水苏糖不能被人体消化利用，通过小肠直接进入大肠，在大肠被肠道微生物分解利用，发酵产气。因此，食用大豆及其制品中的低聚糖是引起肠胃胀气的原因。本实验以棉籽糖和水苏糖标准品作为受试物，分别灌胃给予不同周龄的昆明种小鼠，观察两者是否引起小鼠肠胃胀气；应用本研究室制备的基因重组α-半乳糖苷酶对棉籽糖和水苏糖进行酶解，观察酶解后的低聚糖对小鼠肠胃胀气的缓解情况。
一、试验研究
试验一：研究不同剂量棉籽糖和水苏糖对小鼠肠胃胀气的影响
分别选择4w龄，体重20±2和8w龄体重28±2g的昆明种小鼠，每个年龄组各80只，雌雄各半，随机各分为八组设计，其中四组灌胃给予棉籽糖，以成人推荐剂量 3 倍、30倍和 100 倍，即 26.7、267 和 889 mg/（kg bw）为低、中、高剂量；四组灌胃给予水苏糖，以成人推荐剂量1倍、3 倍、和 30 倍，即 8.9、26.7 和267mg/（kg bw）为低、中、高剂量；空白对照组灌胃给予蒸馏水。如表1。
表1 处理及分组
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处理 |
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对照组 |
低剂量组 |
中剂量组 |
高剂量组 |
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棉籽糖剂量 |
0 |
26.7 mg/kg体重 |
267 mg/kg体重 |
889 mg/kg体重 |
|
水苏糖剂量 |
0 |
8.9mg/kg体 |
26.7 mg/kg体重 |
267 mg/kg体重 |
表2 棉籽糖对小鼠肠道胀气的影响
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组 别 |
剂 量 |
胀肠容积（mL） |
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|
4周龄鼠 |
8周龄鼠 |
||
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对 照 组 |
0 |
0.781±0.113 |
1.161±0.170 |
|
低剂量组 |
26.7 mg/kg体重 |
0.831±0.135 |
1.323±0.172 a |
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中剂量组 |
267 mg/kg体重 |
0.911±0.129a |
1.401±0.209 b |
|
高剂量组 |
889 mg/kg体重 |
0.932±0.128b |
1.515±0.167 b |
对于 4 w 龄昆明小鼠，灌胃给予棉籽糖中剂量 267 mg/（kg bw），与空白对照组比，已有显著的差异，即已经产生胀气现象。而 8 w 龄昆明小鼠，灌胃给予低剂量棉籽糖 26.7 mg/(kg bw)，与空白对照组比，有极显著的差异，即已经产生明显的肠胃胀气现象。说明成年小鼠比幼鼠容易产生由棉籽糖引起的胀气。
表3 水苏糖对小鼠肠道胀气的影响
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组 别 |
剂 量 |
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